Charakterystyka receptorów królików jelita krętego dla toksyny Clostridium difficile A. Dowód na obecność białka G sprzężonego z receptorem.

Celem tego badania było scharakteryzowanie powierzchniowego receptora dla toksyny A, enterotoksyny z Clostridium difficile, na granicy szczoteczkowej jelit królika (BB) i na komórkach leukemii bazofilowej szczura (RBL). Oczyszczona toksyna A została wyznakowana radioaktywnie przy użyciu zmodyfikowanej metody Boltona-Huntera do czynności 2 mikroCi / mikrogramy, z zachowaniem pełnej aktywności biologicznej. 3H-toksyna A wiąże się specyficznie do pojedynczej klasy receptorów na króliczym BB i na komórkach RBL ze stałymi dysocjacji 5,4 x 10 (-8) i 3,5 x 10 (-8) M, odpowiednio. Komórki RBL były bardzo wrażliwe na toksynę A (zaokrąglanie komórek) i miały 180 000 swoistych miejsc wiązania na komórkę, podczas gdy fibroblasty IMR-90 były znacznie mniej wrażliwe na toksynę A i nie miały wykrywalnych swoistych miejsc wiązania. Ekspozycja BB na trypsynę lub chymotrypsynę znacząco zmniejszała wiązanie specyficzne dla toksyny 3H. Preinkubacja BB z lektyną Bandeirea simplicifolia (BS-1) również zmniejszyła specyficzne wiązanie, a receptory solubilizowane CHAPS można było unieruchomić za pomocą agarozy WGA. Dodanie 100 nM toksyny A przyspieszyło połączenie 35S-GTP gamma S z króliczym jelitem BB i preinkubację BB z analogami GTP GTP gamma S lub Gpp (NH) p, znacząco zmniejszając specyficzne wiązanie 3H toksyny A. Nasze dane wskazują, że receptorem błonowym dla toksyny A jest galaktoza i glikoproteina zawierająca N-acetyloglukozaminę, która wydaje się być sprzężona z białkiem G.
[podobne: zaburzenia somatyczne, zespół mielodysplastyczny, zapalenie okostnej objawy ]